• product_banner

Monkeypox Virus reālā laika PCR komplekts

Īss apraksts:

kat.Nē B001P-01 Izmērs 48 Testi/Komplekts
Eksemplārs Serums/ Bojājuma eksudāts Trans.& Sto.Temp. -25-15 ℃
Formāts Premikss tika liofilizēts un sadalīts alikvotās 8 sloksnes PCR mēģenēs
Piemērojamais instruments Reāllaika PCR instruments, piemēram, ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio un BTK-8

Produkta informācija

Produktu etiķetes

Produkta informācija

Paredzētais lietojums

To izmanto pērtiķu baku vīrusa noteikšanai cilvēka seruma vai bojājuma eksudāta paraugos, izmantojot reāllaika PCR sistēmas.

Testa princips

Šis produkts ir uz fluorescējošu zondi balstīta Taqman® reāllaika PCR testa sistēma.Pērtiķu baku vīrusa F3L gēna noteikšanai ir paredzēti specifiski praimeri un zondes.Iekšējā kontrole, kas vērsta uz cilvēka saglabāto gēnu, uzrauga paraugu ņemšanu, paraugu apstrādi un reāllaika PCR procesu, lai izvairītos no viltus negatīviem rezultātiem.Komplekts ir pilnībā premiksēta liofilizēta sistēma, kurā ietilpst pērtiķu baku vīrusa noteikšanai nepieciešamie materiāli: nukleīnskābju amplifikācijas enzīms, UDG enzīms, reakcijas buferis, specifisks gruntējums un zonde.

Galvenais saturs

Norādītās sastāvdaļas ir norādītas tabulā.

Sastāvdaļas

Iepakojums

Sastāvdaļa

Pērtiķu baku vīrussLiofilizēts premikss 8 sloksnes PCR mēģenes× 6 maisiņi Praimeri, zondes, dNTP/dUTP maisījums, Mg2+, Taq DNS polimerāze, UDG enzīms
MPV pozitīvā kontrole 400 μL × 1 caurule DNS sekvences, kas satur mērķa gēnu
MPV negatīvā kontrole 400 μL × 1 caurule DNS sekvences, kas satur cilvēka gēnu segmentu
Šķīdināšanas šķīdums 1 ml × 1 caurule Stabilizators
Atbilstības sertifikāts 1 gab

/

Operācija Plūsma

1. ParaugsKolekcija:Paraugi jāsavāc sterilās mēģenēs saskaņā ar

ar standarta tehniskajām specifikācijām.

2. Reaģenta sagatavošana (reaģenta sagatavošanas zona)

Izņemiet komplekta sastāvdaļas, līdzsvarojiet tās istabas temperatūrā, lai varētu izmantot gaidīšanas režīmā.

3. Paraugu apstrāde (paraugu apstrādes zona)

3.1 Nukleīnskābju ekstrakcija

Nukleīnskābju ekstrakcijai ieteicams ņemt 200 μL šķidruma paraugus, pozitīvo kontroli un negatīvo kontroli saskaņā ar attiecīgajām vīrusu DNS ekstrakcijas komplektu prasībām un procedūrām.

3.2. Liofilizēta pulvera izšķīdināšana un šablona pievienošana

Sagatavojiet Monkeypox Virus liofilizēto premiksu atbilstoši paraugu skaitam.Vienam paraugam nepieciešama viena PCR caurule, kurā ir liofilizēts premiksa pulveris.Negatīvā kontrole un pozitīvā kontrole jāuzskata par diviem paraugiem.

(1) Pievienojiet 15 μL šķīdināšanas šķīduma katrā PCR mēģenē, kurā ir liofilizēts premikss, pēc tam pievienojiet 5 μL ekstrahētos paraugus/negatīvo kontroli/pozitīvo kontroli katrā PCR mēģenē.

(2) Cieši nosedziet PCR mēģenes, ar roku švīkājiet PCR mēģenes, līdz liofilizētais pulveris ir pilnībā izšķīdis un sajaukts, savāciet šķidrumu līdz PCR stobriņu apakšai, veicot tūlītēju zema ātruma centrifugēšanu.

(3) Ja noteikšanai izmanto parasto reāllaika PCR instrumentu, tad tieši pārnes PCR mēģenes uz amplifikācijas zonu;ja noteikšanai izmanto BTK-8, tad jāveic šādas darbības: pārnes 10 μL šķidruma no PCR caurules uz BTK-8 reakcijas mikroshēmas iedobi.Viena PCR caurule atbilst vienai mikroshēmas iedobei.Pipetēšanas laikā pārliecinieties, ka pipete ir 90 grādu vertikāli.Aerosola barjeras pipetes uzgaļi jānovieto iedobes centrā ar mērenu spēku un jāpārtrauc pipetes stumšana, kad tā sasniedz pirmo pārnesumu (lai izvairītos no burbuļu veidošanās).Pēc tam, kad iedobes ir piepildītas, izņemiet reakcijas mikroshēmas membrānu, lai pārklātu visas iedobes, un mikroshēma tiek pārnesta uz amplifikācijas noteikšanas zonu.

4. PCR pastiprināšana (noteikšanas apgabals)

4.1. Ievietojiet PCR mēģenes/reakcijas mikroshēmu reakcijas tvertnē un iestatiet katras reakcijas iedobes nosaukumus attiecīgajā secībā.

4.2. Noteikšanas fluorescences iestatījumi: (1) pērtiķu baku vīruss (FAM);(2) Iekšējā kontrole (CY5).

4.3 Palaidiet tālāk norādīto riteņbraukšanas protokolu

ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio protokols:

Soļi

Temperatūra

Laiks

Cikli

1

Iepriekšēja denaturācija

95℃

2 min

1

2

Denaturācija

95℃

10 s

45

Atkvēlināšana, pagarināšana, fluorescences iegūšana

60℃

30 s

 BTK-8 protokols:

Soļi

Temperatūra

Laiks

Cikli

1

Iepriekšēja denaturācija

95℃

2 min

1

2

Denaturācija

95℃

5 s

45

Atkvēlināšana, pagarināšana, fluorescences iegūšana

60℃

14 s

5. Rezultātu analīze (lūdzu, skatiet instrumenta lietotāja rokasgrāmatu)

Pēc reakcijas rezultāti tiks automātiski saglabāti.Noklikšķiniet uz “Analīze”, lai analizētu, un instruments automātiski interpretēs katra parauga Ct vērtības rezultātu kolonnā.Negatīvie un pozitīvie kontroles rezultāti atbilst šādam "6. Kvalitātes kontrole".

6. Kvalitātes kontrole

6.1. Negatīvā kontrole: nav Ct vai Ct>40 FAM kanālā, Ct≤40 CY5 kanālā ar normālu pastiprināšanas līkni.

6.2. Pozitīvā kontrole: Ct≤35 FAM kanālā ar normālu pastiprināšanas līkni, Ct≤40 CY5 kanālā ar normālu pastiprinājuma līkni.

6.3. Rezultāts ir spēkā, ja ir izpildīti visi iepriekš minētie kritēriji.Pretējā gadījumā rezultāts ir nederīgs.

Rezultātu interpretācija

Ir iespējami šādi rezultāti:

  FAM kanāla Ct vērtība CY5 kanāla Ct vērtība Interpretācija

1#

Bez Ct vai Ct>40

≤40

Pērtiķu baku vīruss ir negatīvs

2#

≤40

Jebkuri rezultāti

Pozitīvs pērtiķu baku vīruss

3#

40–45

≤40

Atkārtota pārbaude;ja tas joprojām ir 40–45, ziņojiet kā 1#

4#

Bez Ct vai Ct>40

Bez Ct vai Ct>40

Nederīgs

PIEZĪME: Ja tiek iegūts nederīgs rezultāts, paraugs ir jāsavāc un vēlreiz jāpārbauda.

Pasūtījuma informācija

produkta nosaukums kat.Nē Izmērs Eksemplārs Glabāšanas laiks Trans.& Sto.Temp.
Monkeypox Virus reālā laika PCR komplekts B001P-01 48 testi/komplekts Serums/ Bojājuma eksudāts 12 mēneši -25-15 ℃

  • Iepriekšējais:
  • Nākamais:

  • Uzrakstiet savu ziņu šeit un nosūtiet to mums